技术问答
粪水和原始粪便样本的稳定性
1月 30, 2019
除了直接冻存收集的新鲜粪便,另一种方式是按1:2(粪便:水)或其他比例加入水或PBS,振荡后,超速离心获得粪水,以粪水的形式存储。如下图所示,新鲜粪便在-20℃放置1h后,代谢轮廓即发生了较为明显的改变[1] 。冻存24h后粪水的代谢轮廓更稳定,和新鲜粪水没有明显差异,但粪水在室温下放置5h及冷藏下放置24h以上,代谢轮廓开始明显偏移[1]。需要指出的是,粪水样品对于检测疏水性强的化合物并不适合。另外,冻干粪便也是一种选择。一般200mg的新鲜粪便可获得约40mg的冻干粪便[2]。Lee等[3]对比了粪水和冻干粪便的差异,发现粪水中疏水性的长链醇、酯和甾醇类损失明显。冻干粪便亦有缺点,即冻干的过程会损失挥发性的代谢物,如SCFAs[4]。
图3.不同温度和时间存储粪便和粪水样本的PCA图